Product classification
普通層析柱 柱內壓可增加(1bar~2bar)
纖維素類填料
親和層析填料
疏水層析填料
離子交換填料-瓊脂糖凝膠
離子交換填料-葡聚糖凝膠
凝膠過濾填料-瓊脂糖凝膠系列
凝膠過濾填料-葡聚糖凝膠 G系列
凝膠過濾填料—葡聚糖凝膠 LH系列
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Sephadex G-25 medium 葡聚糖凝膠G-25使用說明 化學和物理性質葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質溶液中溶脹。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度,因此它們的溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細級的葡聚糖凝膠是用于需要分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗級和中級的凝膠用于制備性色譜過程,可在較低的壓力下獲得較高的流速。另外,粗級也可用于批量工藝。化學穩(wěn)定性葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑(除非它被化學降解)。它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的,在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑將破壞凝膠,因而應避免使用。物理穩(wěn)定性葡聚糖凝膠并不熔融,可以在濕態(tài)、中性 PH 進行滅菌或在高壓滅菌器 120℃、 30 分鐘而不影響它的色譜性質。干態(tài)的凝膠加熱至120℃以上將開始焦糖化。葡聚糖凝膠的機械強度取決于交聯(lián)度。 產品說明:產 品 名 稱 分 離 范 圍 應 用葡聚糖凝膠 G-10 <700 緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子葡聚糖凝膠 G-15 <1500 緩沖液交換、脫鹽,分離小分子,去除小分子葡聚糖凝膠 G-25 1000-5000 工業(yè)上脫鹽及交換緩沖液葡聚糖凝膠 G-50 1000-30000 多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測定葡聚糖凝膠 G-75 2000-70000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定葡聚糖凝膠 G-100 2000-120000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定葡聚糖凝膠 G-150 5000-300000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定葡聚糖凝膠 G-200 5000-600000 蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定
使用方法:1. 乙醇浸泡: 在室溫下,將干粉浸泡于 50-60%乙醇中至少 24 小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;2. 無鹽水浸泡: 室溫下,在無鹽水中充分溶脹 24 小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹,然后;3. 鹽酸浸泡: 在常溫下再用 0.2N HCl 浸泡 12 小時,間隙攪拌,濾干,水洗只中性;4. 將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內,注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內產生氣泡或斷層;5. 上樣前平衡層析柱至少 3-5 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的 Buffer 的 PH值);6. 凝膠過濾的上樣量一般為 5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在 1-2%的床體積,視分離情況可以調整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關,柱高控制在 40-50cm 以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為 5:1 即可;7. 洗脫方法: 可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱 Buffer 中加入 NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;8. 在位清洗(CIP) 凝膠使用十次后作一次 CIP,目的是去除柱床內沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以 40cm/h 用 1M 氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。 備注: 其它規(guī)格葡聚糖凝膠處理方法類似。
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