支原體檢測試劑盒

描述：英文名稱Mycoplasma Detection Kit
儲存條件2-8℃，避光
有效期1年
規(guī)格100T 200T
單位盒

更新時間：2023-04-27

產(chǎn)品型號：CA1080-100T

所在城市：北京市

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：1652

聯(lián)系我們在線留言

產(chǎn)品簡介

英文名稱	Mycoplasma Detection Kit
儲存條件	2-8℃，避光
有效期	1年
規(guī)格	100T 200T
單位	盒

本試劑盒是利用熒光染料（bisbenzimide,Hoechst 33258）檢測支原體污染。這種染料會結(jié)合到DNA的A-T富集區(qū)域，因?yàn)橹гw的DNA中A-T含量高（55％～80％），所以可將其染色而被檢測到。被支原體污染的細(xì)胞經(jīng)染色后在細(xì)胞周圍可看到許多大小均一的熒光小點(diǎn)，即為支原體的DNA染色斑，說明有支原體污染。Hoechst 33258的最大激發(fā)波長為346nm，最大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，最大激發(fā)波長為352nm，最大發(fā)射波長為461nm。

操作步驟：

貼壁細(xì)胞：

1.被檢細(xì)胞接種于無菌的6孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，接種密度為1-2×104。同時，接種正常無支原體感染的同種細(xì)胞，作為陰性對照。

2.5天后，先吸去培養(yǎng)液，再加入1ml的固定液，靜置20min，

3.吸去固定液，晾干。

4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞），37℃避光放置15-20min或室溫靜置20～30min。

5.吸去Hoechst 33258工作液，加入2ml滅菌超純水洗滌三次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封片液，并以蓋玻片覆蓋。

6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周圍是否有藍(lán)色熒光小點(diǎn)或串珠狀熒光小點(diǎn)。

懸浮細(xì)胞：

1.收集需檢測的細(xì)胞，1500rpm，5min。

2.將收集的細(xì)胞涂片于載玻片上，再加1ml的固定液，靜置20min。

3.吸去固定液，晾干。

4.于每孔中，加入1ml的Hoechst33258工作液（Hoechst 33258工作液須覆蓋全部被檢細(xì)胞），37℃避光放置15～20min或室溫靜置20～30min。

5.吸去Hoechst 33258工作液，用無菌水洗滌玻片3次，直接風(fēng)干。風(fēng)干后加入一滴封固液，并以蓋玻片覆蓋。

6.熒光顯微鏡觀察。用紫外激發(fā)光激發(fā)，觀察細(xì)胞周圍是否有藍(lán)色熒光小點(diǎn)或串珠狀熒光小點(diǎn)。

結(jié)果判斷（參考）：

陰性：僅見細(xì)胞的細(xì)胞核呈現(xiàn)黃綠色熒光。

陽性：除細(xì)胞外，細(xì)胞周圍可見大量的大小均一的熒光著色顆粒。

注意事項(xiàng)：

1.Hoechst工作液對人體有害，請注意防護(hù)。

2.固定液有刺激性氣味，建議在通風(fēng)櫥進(jìn)行固定。

3.支原體檢測時，最好用不含抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)2～3代，這樣容易避免假陰性結(jié)果。

4.本試劑盒用于6孔板檢測時，可以進(jìn)行50次檢測反應(yīng)。

5.檢測支原體污染，可以使用支原體高效Vero細(xì)胞，這樣可以提高檢測靈敏度，即將被檢測樣品接種于Vero細(xì)胞進(jìn)行檢測。

備注：

以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻(xiàn), Solarbio暫未進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證, 僅供參考。

These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.

公司簡介

上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體，并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心，以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨"的發(fā)展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司織結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)部管理科學(xué)，擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊伍，保持了各個部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn)，充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于地位。公司注重與*合作，目前已與 Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系，代理其世界的*產(chǎn)品，并在全國各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、競爭力的價格，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)！立足北京，上海，*，隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員，歡迎垂詢并期待您的加入！