產(chǎn)品簡(jiǎn)介

詳細(xì)說明：

Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑是一種多用途轉(zhuǎn)染試劑，可在各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中提供高效轉(zhuǎn)染。

研究人員可使用Lipofectamine 2000試劑進(jìn)行基于siRNA和shRNA的基因敲除實(shí)驗(yàn)及基因表達(dá)研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染的佳試劑。


采用Lipofectamine 2000試劑，您可以實(shí)現(xiàn)：

在各種細(xì)胞系中具有的轉(zhuǎn)染效率和高重組蛋白表達(dá)水平 (表1)

出眾的siRNA和質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染性能

在血清存在時(shí)亦具有可靠的轉(zhuǎn)染效率 – 轉(zhuǎn)染后無需更換培養(yǎng)基

適用于高通量應(yīng)用的可靠性能

建立穩(wěn)定細(xì)胞系的佳選擇


適用于基因表達(dá)和基因沉默的高性能轉(zhuǎn)染試劑

Lipofectamine 2000試劑適合所有常見細(xì)胞系及許多難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，可用于含有或不含

血清的培養(yǎng)基。在基因沉默應(yīng)用中，Lipofectamine 2000試劑的高效轉(zhuǎn)染提供了很高的基因敲除水平，

足以獲得令人信服的結(jié)果。Lipofectamine 2000試劑可實(shí)現(xiàn)siRNA和質(zhì)粒DNA的高效轉(zhuǎn)染，它是共轉(zhuǎn)染的

*試劑。Lipofectamine 2000試劑使用方便 – 只需將其與核酸混合，加入細(xì)胞培養(yǎng)物即可。


適合高通量操作

Lipofectamine 2000試劑使用簡(jiǎn)單、快速且具有很高的轉(zhuǎn)染效率，適用于瞬時(shí)蛋白表達(dá)或

高通量RNAi轉(zhuǎn)染。在上述應(yīng)用中，可輕松建立自動(dòng)化或機(jī)器人系統(tǒng)轉(zhuǎn)染條件。如需了解有關(guān)

Lipofectamine 2000的實(shí)驗(yàn)方案、文獻(xiàn)引證及其它產(chǎn)品信息，可登錄細(xì)胞系數(shù)據(jù)庫。


僅供研究使用。不得用于人或動(dòng)物的治療或診斷。

Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑是一種多用途轉(zhuǎn)染試劑，可在各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中提供高效轉(zhuǎn)染。

研究人員可使用Lipofectamine 2000試劑進(jìn)行基于siRNA和shRNA的基因敲除實(shí)驗(yàn)及基因表達(dá)研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染的佳試劑。


脂質(zhì)體2000 描述

脂質(zhì)體2000是專門用于將核酸轉(zhuǎn)染進(jìn)入真核細(xì)胞的一種形式我們提供下列的建議

在多種細(xì)胞和培養(yǎng)板中都有很高的轉(zhuǎn)染效率。在網(wǎng)上列出的細(xì)胞類型中都獲得了較高的轉(zhuǎn)染效率。 核酸-脂質(zhì)體2000的復(fù)合物可以直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中無論是有血清還是無血清的情況。 轉(zhuǎn)染之后不用移除復(fù)合物或者更換培養(yǎng)液但是復(fù)合物應(yīng)在轉(zhuǎn)染后4-6h移除。 轉(zhuǎn)染的一些重要指導(dǎo) DNA轉(zhuǎn)染使用page3 我們建議使用Opti-MEM I reduced serum  培養(yǎng)基來稀釋脂質(zhì)體2000和核酸。 轉(zhuǎn)染時(shí)不要向培養(yǎng)基中加入抗生素。 在實(shí)驗(yàn)過程中要保持一樣的條件  

DNA轉(zhuǎn)染 使用下列方法

在24孔板內(nèi)轉(zhuǎn)染DNA進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。對(duì)于其他的板子可以參考page4.所有的數(shù)量和體積都是基于一個(gè)孔的劑量。準(zhǔn)備復(fù)合物使DNAug脂質(zhì)體ul的比例為1:2到1:3。轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度較高可以獲得高的效率高的表達(dá)水平以及使毒性降低。條件的選擇很重要。

1. 貼壁細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前一天向24孔板內(nèi)接種0.5-2*105個(gè)細(xì)胞使得細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時(shí)融合率達(dá)到90-95%。切記使用不含抗生素的培養(yǎng)基。

2. 對(duì)于每一個(gè)轉(zhuǎn)染樣品按照如下方法準(zhǔn)備復(fù)合物 A 使用無血清的培養(yǎng)基將DNA稀釋為50ul溫和混勻。 B 使用前混勻脂質(zhì)體2000然后用培養(yǎng)基將一定量的脂質(zhì)體2000稀釋為50ul。室溫孵育5min。 進(jìn)行到c時(shí)間不超過25min     C5min的孵育后混合稀釋的DNA和稀釋的脂質(zhì)體2000總體積為100ul。溫和混勻室溫孵育20min溶液呈現(xiàn)云霧狀.混合物在室溫可穩(wěn)定存在6h。

3. 向含有細(xì)胞和培養(yǎng)液的板子中每孔加入100ul的復(fù)合物通過敲打板子和來回晃動(dòng)使其混合均勻。

4. 細(xì)胞孵育18-48h后可檢測(cè)轉(zhuǎn)染情況。培養(yǎng)液可在轉(zhuǎn)染4-6h后更換。

5. 對(duì)穩(wěn)定的細(xì)胞系傳代細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后以1:10的比例加入新鮮的培養(yǎng)液。第二天加入選擇培養(yǎng)基。  優(yōu)化轉(zhuǎn)染 為了獲得高的轉(zhuǎn)染效率和低毒性通過調(diào)整細(xì)胞濃度和DNA:脂質(zhì)體2000的比例來優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件。確保細(xì)胞90%的融合以及DNA(ug)脂質(zhì)體ul比例在1:0.5到1:5。   轉(zhuǎn)染條件的浮動(dòng)   轉(zhuǎn)染到不同類型的培養(yǎng)板中脂質(zhì)體2000的核酸的量細(xì)胞數(shù)以及合適的培養(yǎng)基量都在下表中顯示。在96孔板中建議總體積到50ul。

公司簡(jiǎn)介

    上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體，并能提供的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為中心，以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長(zhǎng)。公司織結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)部管理科學(xué)，擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍，保持了各個(gè)部門之間的高效合作運(yùn)轉(zhuǎn)，充分保障了公司在充滿競(jìng)爭(zhēng)的市場(chǎng)中處于地位。公司注重與*合作，目前已與 Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系，代理其世界的*產(chǎn)品，并在全國各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格，所有這些都保證了我們向您提供的是專業(yè)的服務(wù)！立足北京，上海，*，隨著產(chǎn)品營(yíng)銷戰(zhàn)略的不斷延伸，我們將逐步發(fā)展成為*的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起，利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神，為中國生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展，現(xiàn)公司正在誠招各地代商和招聘若干銷售、研發(fā)人員，歡迎垂詢并期待您的加入！

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