該如何使用OCT冰凍切片包埋劑看完本篇你就知道了
更新時間:2023-06-23 | 點擊率:7920
OCT(Optimal Cutting Temperature)冰凍切片包埋劑是一種用于保存組織樣本并進行快速冷凍切片的工具。
以下是使用OCT冰凍切片包埋劑的基本步驟:
1.準備組織樣本:將需要研究的組織樣本取出,并在無菌條件下進行處理和固定,例如用緩沖液或福爾馬林溶液進行固定。
2.制備OCT包埋劑:將OCT包埋劑從-20℃冷藏中取出,并在常溫下靜置15-30分鐘使其恢復(fù)至室溫下。然后,將OCT包埋劑倒入一個已經(jīng)準備好的包埋模具中,讓其平均分布。
3.冷凍組織樣本:將固定好的組織樣本迅速轉(zhuǎn)移到OCT包埋劑中,應(yīng)盡量避免氣泡產(chǎn)生。然后,將樣本與OCT包埋劑一起放入干燥冰鹽混合物中,使其迅速冷凍。
4.包埋組織樣本:待樣本冷凍后,將OCT包埋劑及其中的組織樣本從冰鹽混合物中取出,并迅速安置到預(yù)先準備好的組織包埋模具中。確保樣本位置正確、不斷口和方向一致,使其能夠被正確地切割。
5.再次冷凍:將組織樣本再次放回到干燥冰鹽混合物中,并迅速冷凍至-70℃左右。這有助于保持樣本和OCT包埋劑的完整性和穩(wěn)定性。
6.切割樣本:使用特制的微型切片機將已經(jīng)包埋的組織樣本進行切割,厚度可根據(jù)需要進行調(diào)整。在此過程中,應(yīng)謹慎避免樣本移位或損壞。
7.保存樣本:將切割好的樣本用無菌保存介質(zhì)(例如PBS)沖洗后,置于-80℃或液氮中保存。這樣可以長期保存樣本并保持其完整性和質(zhì)量。
總之,OCT冰凍切片包埋劑是一個方便、快速而可靠的工具,適用于各種生物組織的研究。在使用時,需要注意無菌操作,并嚴格按照生產(chǎn)廠家提供的說明進行操作,以確保樣本和數(shù)據(jù)的可靠性和準確性。