透析袋簡介及處理
透析袋簡介:
透析技術自Thomas Graham 于1861年發(fā)明到現(xiàn)在已有一百多年的歷史,它已成為生物化學實驗室簡便,常用的分離純化技術之一。在生物大分子的制備過程中,去除鹽、少量有機溶劑、小分子雜質、樣品濃縮和改變微量樣品的緩沖系統(tǒng)等都要用到透析技術。
生物樣品的透析只需使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內,浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內,而鹽和小分子等物質不斷擴散透析到袋外,直到袋內、外兩邊的濃度達到平衡。保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的溶質濃度梯度形成的。透析的速度同欲透析的小分子溶質在膜內外兩邊的濃度梯度、膜的面積和溫度成正比,與膜的厚度成反比。升高溫度可加快透析速度。為大限度地保持生物大分子的活性,通常采用4℃透析。 透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜。目前較常用的是美國Union Carbide (聯(lián)合碳化物公司)和美國光譜醫(yī)學公司生產(chǎn)的各種尺寸的透析管,其截留分子量MwCO(即留在透析袋內的生物大分子的小分子量,縮寫為MwCO)通常從700到數(shù)萬不等。
商品化的透析袋可制成管狀,其扁平寬度為6~50 mm不等。為防干裂,出廠前一般都經(jīng)10%的甘油處理,透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質,它們對蛋白質和其它生物活性物質有害,用前必須除去。新購進的透析袋必須經(jīng)過處理才能使用。50%的乙醇煮沸1小時,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,再用蒸餾水沖洗后即可使用。實驗證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質特別有效。使用后的透析袋洗凈后可存于蒸餾水中,置4℃保存。若長時間不用,可加入適量的疊氮鈉(NaN2),以抑制微生物的生長。干的透析袋彎折時易出現(xiàn)裂口,用時必須仔細檢查。
經(jīng)過處理的透析袋,使用時,一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿蒸餾水,用手指稍加壓,檢查是否漏液,確證無誤后,再用蒸餾水洗凈,方可裝入待透析樣品。裝入樣品時通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,因透析樣品中的小分子濃度較大,袋外的水和緩沖液過量進入袋內將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質溶液透析過液時,體積增加是正常的,有時甚至可達50%以上。透析可以使用燒杯、量筒和塑料桶等容器,容器的大小以20-50:1為宜。少量樣品溶液的透析,可在袋內放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
通常為了把握透析效果,有時需要對透析液中欲去除的小分子殘留物進行分析,如甘氨酸、二甲基甲酰胺、甲醛、戊二醛、碳酸根、偶聯(lián)劑等。小分子殘留物的檢測分析方法很多,如 (NH4)2SO4可用1%的BaCl2檢查,NaCl、KCl等可用1%的AgNO3 檢查。有些檢測方法比較復雜,或需要一定的條件,如確有必要可參考相關文獻資料。
為了加快透析速度,提高透析效率,除及時更換透析液外,還可使用磁力攪拌,還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設計與制作各種簡易的透析裝置。美國生物醫(yī)學公司(Biomed Instruments Inc.)生產(chǎn)的各種型號的Zeineh 透析器,由于使用對流透析的原理,使透析速度和效率大大提高。
附:透析袋的處理 |
1. 根據(jù)需要,把透析管剪截成適當長度(10—20cm)。 |
2. 在大體積的2%(w/v)碳酸氫納和1mmol/L EDTA(pH8.0)中將透析管煮沸10分鐘。 |
3. 用蒸餾水*清洗。 |
4. 于EDTA(1mmol/L,pH8.0)中煮沸10分鐘, |
5. 或將透析管置盛有蒸餾水的燒杯內,高壓蒸汽滅菌10分鐘。 |
6. 冷卻后,存放于4℃。透析管必須確保始終浸于溶液中。 |
7. 從此時起取用透析管時總須戴手套。 |
8. 用前將透析管用蒸餾水清洗干凈后即可使用。 |
普通透析袋附錄:
貨號 | 名稱 | 產(chǎn)地 | 規(guī)格 | 單位 |
MD10-14 | 透析袋MD10(8000-14000)D | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
MD25-14 | 透析袋MD25(8000-14000)D | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
MD34-14 | 透析袋MD34(8000-14000)D | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
MD44-14 | 透析袋MD44(8000-14000)D | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
MD77-14 | 透析袋MD77(8000-14000)D | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
MD34-7 | 透析袋MD34 ( 7000 D ) | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
MD34-3.5 | 透析袋MD34 ( 3500 D ) | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
MD44-3.5 | 透析袋MD44 ( 3500 D ) | 美國 Viskase | 5米/卷 | 卷 |
TXDJZ-60 | 透析袋夾子 | 美國進口 | 60mm | 個 |
TXDJZ-40 | 透析袋夾子 | 美國進口 | 40mm | 個 |
TXDJZ-80 | 透析袋夾子 | 美國進口 | 80mm | 個 |
即用型透析袋附錄:
貨號 | 名稱 | 中文 | MWCO | 規(guī)格 |
131060 | Spectra/Por CE dialysis tubing,100-500 MWCO | 透析袋MD31(100) | 100-500D(道爾頓) | 0.5m |
131096 | Spectra/Por CE dialysis tubing, 500-1000 MWCO | 透析袋MD31(500) | 500-1000D(道爾頓) | 0.5m |
131204 | Spectra/Por CE dialysis tubing, 3500-5000 MWCO | 透析袋MD31(3500) | 3500-5000D(道爾頓) | 0.5m |
131420 | Spectra/Por CE dialysis tubing, 100000 MWCO | 透析袋MD31(100000) | 100kD(10萬道爾頓) | 0.5m |
131450 | Spectra/Por CE dialysis tubing, 300000 MWCO | 透析袋MD16(300000) | 300kD(30萬道爾頓) | 0.5m |
131486 | Spectra/Por CE dialysis tubing, 1000000 MWCO | 透析袋MD16(1000000) | 1000kD(100萬道爾頓) | 0.5m |
132636 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO | 透析袋MD18(1000) | 1KD(一千道爾頓) | 0.5m |
132638 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO | 透析袋MD38(1000) | 1KD(一千道爾頓) | 0.5m |
132640 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 1K MWCO | 透析袋MD45(1000) | 1KD(一千道爾頓) | 0.5m |
132620 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO | 透析袋MD18(2000) | 2KD(二千道爾頓) | 0.5m |
132625 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO | 透析袋MD38(2000) | 2KD(二千道爾頓) | 0.5m |
132633 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 2K MWCO | 透析袋MD45(2000) | 2KD(二千道爾頓) | 0.5m |
132590 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 3.5K MWCO | 透析袋MD18(3500) | 3.5KD(三千五道爾頓) | 0.5m |
132592 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 3.5K MWCO | 透析袋MD45(3500) | 3.5KD(三千五道爾頓) | 0.5m |
128058 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO, | 透析袋MD18(8000) | 8KD(八千道爾頓) | 0.5m |
132582 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO, | 透析袋MD32(8000) | 8KD(八千道爾頓) | 0.5m |
132586 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 8K MWCO, | 透析袋MD50(8000) | 8KD(八千道爾頓) | 0.5m |
128118 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO | 透析袋MD18(10000) | 10KD(一萬道爾頓) | 0.5m |
132574 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO | 透析袋MD32(10000) | 10KD(一萬道爾頓) | 0.5m |
132576 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 10K MWCO | 透析袋MD45(10000) | 10KD(一萬道爾頓) | 0.5m |
128158 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO | 透析袋MD18(15000) | 15KD(一萬五千道爾頓) | 0.5m |
132564 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO | 透析袋MD32(15000) | 15KD(一萬五千道爾頓) | 0.5m |
132566 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 15K MWCO | 透析袋MD45(15000) | 15KD(一萬五千道爾頓) | 0.5m |
128218 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 25K MWCO | 透析袋MD18(25000) | 25KD(二萬五千道爾頓) | 0.5m |
132554 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 25K MWCO | 透析袋MD34(25000) | 25KD(二萬五千道爾頓) | 0.5m |
132544 | Spectra/Por 6 dialysis tubing, 50K MWCO | 透析袋MD34(50000) | 50KD(五萬道爾頓) | 0.5m |
132680 | Spectra/Por 2 dialysis tubing, 12-14K MWCO | 透析袋MD45(12000-14000) | 12-14KD(1.2萬到1.4萬道爾頓) | 0.5m |
1-0550-18 | H1 High Grade Membrane | 透析袋md18(5000) | 5kd | 0.5m |
1-0550-30 | H1 High Grade Membrane | 透析袋md30(5000) | 5kd | 0.5m |
1-0550-40 | H1 High Grade Membrane | 透析袋md40(5000) | 5kd | 0.5m |
上海索寶現(xiàn)貨供應